Markery serologiczne wirusa zapalenia wątroby typu B

HBsAg jest zewnętrznym składnikiem wirusa zapalenia wątroby typu B, pojawia się we krwi pacjentów z ostrym zapaleniem wątroby w okresie prodromalnym choroby, utrzymuje się przez około 1-4 miesiące i zanika w okresie rekonwalescencji. Oznaczenie HBsAg we krwi jest oznaką przetrwania wirusa zapalenia wątroby typu B. Obserwuje się to u pacjentów z przewlekłymi chorobami wątroby. Mogą występować przypadki „zdrowego nosicielstwa” HBsAg.

HBeAg - oznaczany jest we krwi pacjentów z dodatnim HbsAg, wykrywany jest we wczesnym stadium ostrego wirusowego zapalenia wątroby typu B wkrótce po pojawieniu się HBsAg i zanika do czasu rozwinięcia się obrazu klinicznego.

Kiedy proces zapalny w wątrobie staje się przewlekły, HBeAg pozostaje we krwi razem z HBsAg przez długi okres czasu.

Obecność HBeAg odzwierciedla fazę replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B i koreluje z dużą aktywnością procesu zapalnego w wątrobie oraz zaraźliwością pacjenta.

HBcAg - nie jest wykrywany we krwi, znajduje się w jądrach hepatocytów. W ostatnich latach, za pomocą immunomikroskopii elektronowej, HBcAg został wykryty również w cytoplazmie hepatocytów pacjentów.

Po zakażeniu wirusem zapalenia wątroby typu B, w ramach odpowiedzi immunologicznej organizmu, we krwi pojawiają się przeciwciała przeciwko antygenom wirusa.

Jako pierwsze pojawiają się przeciwciała przeciwko HbcAg - HBcAb (НbсАgАbо-dy), już 2-4 tygodnie po pojawieniu się HBsAg. Większość przeciwciał w tym czasie jest reprezentowana przez klasę IgM (HBcAblgM), które pozostają w surowicy krwi pacjentów przez 6-9 miesięcy. Obecność HBcAblgM wskazuje na ostre lub przewlekłe zapalenie wątroby z trwającą replikacją wirusa zapalenia wątroby typu B. Nieco później we krwi pojawiają się HBcAb klasy IgG, które można oznaczać przez wiele lat. Wykrycie HBcAblgG może wskazywać zarówno na przebyte i całkowicie ustąpione ostre wirusowe zapalenie wątroby typu B, jak i na przetrwanie wirusa zapalenia wątroby typu B.

Przeciwciała przeciwko HBeAg - HBeAb - pojawiają się około 2 tygodnie po wystąpieniu ostrego wirusowego zapalenia wątroby typu B i, w miarę jak stężenie HBeAg maleje, utrzymują się we krwi przez 1 do 5 lat lub dłużej. Pojawienie się HBeAb wskazuje na wyzdrowienie pacjenta lub przejście ostrego wirusowego zapalenia wątroby w przewlekłe, podczas gdy replikacja wirusa zapalenia wątroby typu B ustaje lub znacznie maleje, następuje integracja genomu wirusa zapalenia wątroby typu B z genomem hepatocytów, czemu towarzyszy spadek aktywności procesu zapalnego.

Przeciwciała przeciwko HBsAg - HBsAb - są wykrywane 3-5 miesięcy po wystąpieniu ostrego zapalenia wątroby typu B. Można je wykryć we krwi pacjenta przez 5-10 lat lub dłużej. Pojawienie się tych przeciwciał wskazuje na ustąpienie zakażenia przez układ immunologiczny, ale nie wyklucza się obecności wirusa zapalenia wątroby typu B w hepatocytach.

Niektórzy lekarze uważają, że tylko te przeciwciała mają właściwości ochronne i zapewniają odporność na wirusa zapalenia wątroby typu B.

Sam wirus zapalenia wątroby typu B nie ma bezpośredniego działania cytopatycznego (tzn. wirus sam w sobie nie niszczy hepatocytów); uszkodzenie wątroby można wytłumaczyć wyraźną reakcją immunologiczną organizmu na wprowadzenie wirusa do hepatocytu.

W cyklu życiowym wirusa zapalenia wątroby typu B wyróżnia się dwie fazy: fazę replikacji oraz fazę integracji.

W fazie replikacji wirus ulega reprodukcji (rozmnożeniu). Hepatotropizm wirusa zapalenia wątroby typu B, jego zdolność do penetracji hepatocytu, jest determinowany przez białka błony zewnętrznej regionu pre-S. Na błonach hepatocytów znajdują się strefy polimeryzowanej albuminy odpowiadające receptorom pre-S 1.

W wyniku interakcji białek pre-S z ich receptorami na powierzchni hepatocytu wirus przyłącza się do hepatocytu. W fazie replikacji wirusowe DNA przenika do jądra hepatocytu i na nim, jak na matrycy, przy pomocy polimerazy DNA syntetyzowany jest wirusowy nukleokapsyd, zawierający wirusowe DNA, antygeny HBcAg, HBeAg, HBxAg. Antygeny HBcAg i HBeAg są głównym celem układu odpornościowego. Następnie nukleokapsyd migruje z jądra do cytoplazmy, gdzie replikowane są białka błony zewnętrznej (HBsAg) i w ten sposób składany jest kompletny wirion. W tym przypadku nadmiar HBsAg, niewykorzystany do złożenia wirusa, przedostaje się do krwi przez przestrzeń międzykomórkową. Całkowite zmontowanie (replikacja) wirusa kończy się prezentacją jego rozpuszczalnego antygenu nukleokapsydu - HBeAg na błonie hepatocytu, gdzie jest on "rozpoznawany" przez immunocyty. Wydzielanie HBeAg do krwi odgrywa ogromną rolę w ochronie wirusa przed działaniem układu odpornościowego. Ustalono, że krążący HBeAg tłumi oba ogniwa odporności. Odporność komórkowa jest hamowana przez zmniejszenie syntezy interferonu y (odgrywa on kluczową rolę w procesie rozpoznawania antygenów wirusa zapalenia wątroby typu B przez limfocyty T), odporność humoralna - ze względu na tłumienie tworzenia przeciwciał przez limfocyty B. W ten sposób HBeAg jest w stanie wywołać stan immunotolerancji, a to spowalnia jego usuwanie z zakażonych hepatocytów.

Zdolność wirusa zapalenia wątroby typu B do mutacji została już ustalona. Mutacje o różnej częstotliwości mogą występować praktycznie we wszystkich genach wirusa zapalenia wątroby typu B, ale najczęściej w regionie genu kodującego syntezę HBeAg. W wyniku mutacji wirus traci zdolność do syntezy HBeAg, co pozwala mu uciec spod nadzoru układu odpornościowego i uniknąć eliminacji. Można zatem uznać, że mutację wirusa można uznać za sposób ochrony przed układem odpornościowym i przetrwania (zachowania) wirusa w organizmie człowieka. Bonino (1994) definiuje zmutowanego wirusa zapalenia wątroby typu B jako „HBV minus HBeAg”. Jest on często wykrywany w najcięższych chorobach wątroby wywołanych przez wirus zapalenia wątroby typu B, w szczególności w wariancie HbeAg-ujemnym przewlekłego zapalenia wątroby, który ma następujące cechy:

• brak HBeAg we krwi przy obecności markerów replikacji HBV;
• wykrywanie DNA HBV w surowicy i HBcAg w hepatocytach;
• obecność antygenów nukleokapsydu wirusa HBV zarówno cytoplazmatycznego, jak i jądrowego w zakażonych hepatocytach;
• cięższy przebieg kliniczny choroby;
• mniej wyraźna odpowiedź na leczenie interferonem w porównaniu z przewlekłym zapaleniem wątroby typu B i dodatnim HBeAg.

Zatem wirus typu HBV minus HBeAg jest bardziej patogenny niż wirus HBV dzikiego typu, prawdopodobnie ze względu na wyższą cytopatogenność lub większą wydajność cytotoksycznych limfocytów T.

Obecnie bardziej uzasadniony jest pogląd, że „HBV minus HBeAg” jest zwykle wykrywany przy braku tolerancji na wirusa, podczas gdy populacje niezmutowanego („dzikiego”) wirusa przeważają przy obecności tolerancji na niego. Nierozpoznawalność zmutowanego HBV powoduje niewystarczającą odpowiedź immunologiczną, co zmienia przebieg i wynik wirusowego zapalenia wątroby typu B.

Markerami fazy replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B są:

• wykrywanie HBeAg, HBcAblgM (stosunek HBcAbG/HBcAbM < 1,2), DNA wirusowego w stężeniu > 200 ng/l (oznaczane metodą łańcuchowej reakcji polimerazy), polimerazy DNA i antygenów pre-S (charakteryzujących aktywność funkcjonalną receptorów albuminowych) we krwi;
• wykrywanie HBeAg i DNA HBV w hepatocytach.

U 7-12% pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu B możliwe jest spontaniczne przejście fazy replikacji do fazy niereplikacyjnej (w tym przypadku HBeAg znika z krwi, a pojawia się HBeAb). To faza replikacji decyduje o ciężkości uszkodzenia wątroby i zaraźliwości pacjenta.

Ustalono, że replikacja wirusa zapalenia wątroby typu B zachodzi nie tylko w wątrobie, ale także w hematopoetycznych komórkach progenitorowych (w szpiku kostnym); śródbłonku; monocytach, makrofagach węzłów chłonnych i śledziony, śródbłonku naczyń nerkowych; nabłonku gruczołowym i fibroblastach podścieliska żołądka i jelit; w fibroblastach podścieliska jąder; neurocytach i fibroblastach podścieliska obwodowych, zwojach nerwowych; fibroblastach skóry właściwej. W latach 1995-1996 replikację wirusa zapalenia wątroby typu B wykazano w tkankach serca, płuc, mózgu, gruczołów płciowych, nadnerczy, tarczycy i trzustki.

Pozawątrobowa replikacja wirusa zapalenia wątroby typu B może być przyczyną rozwoju różnych pozawątrobowych (układowych) objawów choroby - przewlekłego uogólnionego zakażenia.

Podczas fazy integracji fragment wirusa zapalenia wątroby typu B niosący gen HBsAg jest integrowany (wbudowywany) w genom (DNA) hepatocytu, z późniejszym utworzeniem głównie HBsAg. W tym przypadku replikacja wirusa ustaje, ale aparat genetyczny hepatocytu kontynuuje syntezę HBsAg w dużych ilościach.

DNA wirusowe może być zintegrowane nie tylko w hepatocytach, ale także w komórkach trzustki, gruczołów ślinowych, leukocytach, plemnikach i komórkach nerek.

Faza integracji jest połączona z ustanowieniem remisji klinicznej i morfologicznej. W tej fazie w większości przypadków tworzy się stan tolerancji immunologicznej na wirusa, co prowadzi do zahamowania aktywności procesu i przenoszenia HBsAg. Integracja sprawia, że wirus staje się niedostępny dla kontroli immunologicznej.

Markery serologiczne fazy integracji:

• obecność we krwi wyłącznie HBsAg lub w połączeniu z HBcAblgG;
• brak wirusowej polimerazy DNA i wirusa DNA we krwi;
• serokonwersja HBeAg do HBeAb (czyli zniknięcie HBeAg z krwi i pojawienie się HBeAb).

W ostatnich latach ustalono, że w zapaleniu wątroby typu B integracja genomu wirusa z genomem hepatocytów nie jest obowiązkowa, lecz opcjonalna. U zdecydowanej większości pacjentów z ostrym zapaleniem wątroby typu B nie rozwija się. W rzadkich przypadkach przewlekłe zakażenie HBV może wystąpić bez integracji z genomem zakażonych hepatocytów. U takich pacjentów odnotowuje się trwającą aktywną replikację HBV.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]