Diagnoza przewlekłej choroby ziarniniakowej

Diagnostyka

Diagnozę przewlekłej choroby ziarniniakowej stawia się na podstawie oceny czynnościowej fagocytów. Stosuje się następujące testy:

1. Test redukcji nitroblue tetrazolium (test NBT). Zwykle, gdy fagocyty absorbują żółty barwnik nitroblue tetrazolium (NBT), ich aktywność metaboliczna wzrasta, podczas gdy NBT ulega utlenieniu, a produkty tej reakcji są zabarwione na niebiesko. Jeśli metabolizm fagocytów jest zaburzony, intensywność niebieskiego zabarwienia spada.
2. Chemiluminescencja neutrofili. Utlenianie substratu jest połączone z emisją światła ultrafioletowego lub fluorescencją, intensywność emisji może być wykorzystana do oceny aktywności funkcjonalnej fagocytów.
3. Ocena aktywności fagocytarnej: zdolność fagocytów do niszczenia bakterii katalazo-dodatnich in vitro.
4. Badania genetyczne pacjentów i ich rodzin mające na celu wykrycie zaburzeń czynnościowej aktywności fagocytów.

Definicja typów i podtypów przewlekłej choroby ziarniniakowej

Immunoblotting z przeciwciałami do wszystkich czterech składników oksydazy NADPH jest powszechnie stosowany do różnicowania przewlekłych typów i podtypów chorób ziarniniakowych. Jeśli jeden ze składników cytozolowych (p47 ^phax lub p67 ^phax ) jest nieobecny w blocie, wskazuje to na mutację w odpowiadającym mu genie, podczas gdy jeśli jeden ze składników błonowych (gр91 ^phax lub p22 ^phax ) jest nieobecny, drugi również nie jest wykrywany, ponieważ podjednostki stabilizują się wzajemnie w celu pełnego dojrzewania i ekspresji. Niektórzy badacze stosują cytoflowmetrię z przeciwciałami anty-cytochrom p558 w celu wykrycia gp91 ^phax /p22 ^phax na powierzchni neutrofili. Ostatecznie diagnozę potwierdza się poprzez zidentyfikowanie mutacji w odpowiadającym mu genie.

Diagnostyka prenatalna przewlekłej choroby ziarniniakowej

Zanim pojawiły się technologie genetyki molekularnej, prenatalną diagnostykę przewlekłej choroby ziarniniakowej przeprowadzano poprzez pomiar aktywności oksydazy NADPH neutrofili płodowych i poprzez pobranie krwi pępowinowej za pomocą fetoskopii w 16–18 tygodniu ciąży. Obecnie przeprowadza się analizę DNA komórek płynu owodniowego lub kosmków kosmówki w celu poszukiwania specyficznych defektów genów za pomocą Southern blotting, reakcji łańcuchowej polimerazy i polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych, co jest bardziej wiarygodne i pozwala na wcześniejsze postawienie diagnozy w ciąży.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]